Einführung in die HPLC

1 Einführung.- 1.1 Geschichte und Grundprinzipien.- 1.2 Instrumentelle Grundausstattung.- 1.3 Zusammenfassung.- 2 Retention und Bandenverbreiterung.- 2.1 Retentionsmessung.- 2.2 Effizienz einer Säule.- 2.3 Die Auflösung.- 2.4 Die Bandenverbreiterung.- 2.5 „Extra-Column-Effects“.- 2.6 Zusammenfassung.- 3 Lösemittelförderung und Injektion der Probe.- 3.1 Eluentenvorratsgefäß.- 3.2 Druck, Fluß und Temperatur.- 3.3 Pumpen - Allgemeine Betrachtungen.- 3.3.1 Druckkonstante Pumpen.- 3.3.2 Flußkonstante Pumpen.- 3.4 Gradientenbildung.- 3.5 Probenaufgabe.- 3.6 Zusammenfassung.- 4 Säulen.- 4.1 Maße und Anschlüsse.- 4.2 Kartuschensysteme.- 4.3 Axiale und radiale Kompression.- 4.4 Zusammenfassung.- 5 Detektoren.- 5.1 Einleitung.- 5.2 Nachweisgrenzen.- 5.3 UV-Absorptions-Detektoren.- 5.4 Der Diodenarraydetektor (DAD).- 5.5 Fluoreszenzdetektor.- 5.6 Elektrochemische (EC) Detektoren.- 5.6.1 Einleitung.- 5.6.2 Amperometrische Detektoren.- 5.6.3 Coulometrische Detektoren.- 5.7 Brechungsindex-Detektoren.- 5.8 Derivatisierungsreaktion.- 5.9 Zusammenfassung.- 6 Die mobile Phase.- 6.1 Die Bedeutung der Polarität in der HPLC.- 6.2 Polaritätsmessung.- 6.3 Die Einteilung der Lösemittel nach Snyder.- 6.4 Isoeluotrope mobile Phasen.- 6.5 Optimierung der mobilen Phasen.- 6.5.1 Sequentielle Methoden.- 6.5.2 Prädektive (vorhersagende) Methoden.- 6.5.3 Iterative Methoden.- 6.5.4 Kommerzielle Systeme.- 6.6 Zusammenfassung.- 7 Säulenpackungen und Methoden der HPLC.- 7.1 Pie stationäre Phase.- 7.2 Gebundene Phasen.- 7.3 Andere stationäre Phasen.- 7.4 Trennmethoden in der HPLC.- 7.5 Normalphasen- und Umkehrphasenchromatographie.- 7.5.1 Hydrophobic-Interaction-Chromatography (HIC).- 7.5.2 Zusammenfassung.- 7.6 Die Ionenchromatographie.- 7.6.1 Ionenaustauschchromatographie.- 7.6.2 Trennmethoden in der IC.- 7.6.3 Faktoren, die die Retention beeinflussen.- 7.6.4 Fällung und Komplexierung.- 7.6.5 Detektionsmethoden in der IC.- 7.6.6 Techniken beim Einsatz des Leitfähigkeitsdetektors.- 7.6.7 Ionenunterdrückung und Ionenpaarchromatograpie.- 7.6.8 Zusammenfassung.- 7.7 Adsorptions- und Ausschlußchromatographie.- 7.7.1 Adsorptionschromatographie.- 7.7.2. Ausschlußchromatographie.- 7.7.3. Zusammenfassung.- 8 Methodenentwicklung.- 8.1 Bestimmung von Coffein in entcoffeiniertem Kaffee.- 8.2 Trennung von Steroiden.- 8.2.1 Zusammenfassung.- 8.3 Gradientelution.- 8.3.1 Die Entwicklung einer Gradienttrennung.- 8.3.2 Zusammenfassung.- 8.4 Quantitative Analyse.- 8.4.1 Flächen/Höhen Prozent (oder innere Normierung).- 8.4.2 Die Methode der externen Standards.- 8.4.3 Die Methode des internen Standards.- 8.4.4 Zusammenfassung.- 9 Praktische Aspekte der HPLC.- 9.1 Packen der Säulen.- 9.1.1 Zusammenfassung.- 9.2 Herstellung der mobilen Phasen.- 9.2.1 Zusammenfassung.- 9.3 Praktische Tips zur Behandlung von Säulen und Proben.- 9.3.1 Behandlung von HPLC-Säulen.- 9.3.2 Schutz der Säule während der Betriebszeit.- 9.3.3 Probenvorbereitung und Clean-up (Probenaufreinigung).- 9.3.4. Säulenschalten.- 9.3.5. Zusammenfassung.- 10 Einige weitere Themen.- 10.1 „Microbore“-Säulen und schnelle HPLC.- 10.1.1 „ Microboret“-Säulen.- 10.1.2 Schnelle HPLC-Trennungen.- 10.1.3 Zusammenfassung.- 10.2 Trennung von Enantiomeren.- 10.2.1 Einleitung.- 10.2.2 Trennung von Diastereomeren.- 10.2.3 Chirale stationäre Phasen (CSP).- 10.2.4 Zusammenfassung.- 10.3 Flash-Chromatographie.- 10.4 Präparative HPLC.- 10.4.1 Zusammenfassung.- 10.5 SFC.- 10.6 LC-MS.- a) Moving belt (dt.: sich bewegendes Band).- b) DLI (Direct Liquid Introduction (dt.: direkte Flüssigkeitszufuhr)).- c) Thermospray.- d) Teilchenstrahl-Interfaces.- 10.6.1 Zusammenfassung.- 11 Antworten.- Antworten von Kapitel.- Antworten von Kapitel.- Antworten von Kapitel.- Antworten von Kapitel.- Antworten von Kapitel.- Antworten von Kapitel.- Antworten von Kapitel.- Antworten von Kapitel.- Antworten von Kapitel.- Maßeinheiten.- Tabellen.- Tabelle 1: Häufig benutzte Symbole und Abkürzungen in der analytischen Chemie.- Tabelle 2: Alternative Einheiten.- Tabelle 3: Vorsätze für SI-Einheiten.- Tabelle 4: Physikalische Konstanten.- Sachwortverzeichnis.